近红外二区(NIR-II)光学分子成像开启了高质量体内成像的新革命，但一直受到组织自身荧光背景和NIR-II探针开发的阻碍。我们通过H₂S响应的NIR-II花菁染料(受体，LET-1055)和H₂S惰性半花菁染料(给体，Rh930)，制备了基于FRET共振能量转移的硫化氢NIR-II比度荧光传感器。该传感器不仅具有高灵敏度和选择性，而且对H₂S具有快速反应动力学和相对较低的检测限，可实现原位肝脏和结肠肿瘤的体内比度NIR-II荧光成像和药物诱导的肝脏H₂S波动的可视化，为推进NIR-II活性传感在体内临床诊断的可行性提供了支持。