内容提要

细胞的生存、生长和分化在很大程度上依赖于外源营养的摄取。然而，在单细胞水平上量化小分子营养物质的摄取是困难的。我们提出了一种新的方法来研究营养吸收在活的单细胞使用逆电按需Diels Alder (IEDDA)化学。我们用四嗪修饰了羧基荧光指示酸琥珀酰酰酯(CFSE)——一种猝灭的荧光团，可以与蛋白质共价反应，并且只在酯酶活性后的细胞胞浆中被激活。该四氮作为第二猝灭剂，用于悬垂的荧光团。在IEDDA反应中，当与富电子修饰的营养物或张力的亲二烯试剂反应时，该猝灭基团被破坏，从而使探针能够发出荧光。这使我们能够使用流式细胞术和活细胞显微镜监测活的原代免疫细胞群中各种含双嗜酸菌的营养物质的摄取。