快速准确的术中病理诊断(IOPD)对术中决策、改善患者预后、避免再次手术至关重要。本研究利用NAD(P) H激活的荧光探针，开发了一种多功能荧光指示剂，可选择性识别正常组织中的肿瘤细胞，实现肿瘤分级鉴定。这种快速反应探针CyQ-1在生理条件下对低纳摩尔水平的NADH具有前所未有的灵敏度和快速反应。此外，该指示剂可在HeLa、A549、MDA-MB-231、4T1、MCF-7、HePG2、HUVEC和HL-7702细胞中进行NADH比色和荧光检测。将该指标扩展到高级组织模型，进一步验证了其在120例结直肠癌石蜡包埋切片和20例肺癌术中冷冻切片中显示NADH的能力。基于CyQ-1的肿瘤分级鉴定与石蜡切片和冷冻切片的组织学分级“金标准试验”的一致性分别为92.5%和100%。对低分化、中度分化和高分化肿瘤切片的敏感性和特异性均在90%以上。总之，临床切片快速准确的检测NADH的能力使该指标成为临床IOPD量化和肿瘤分化分级识别的潜在候选指标。