程序性癌细胞死亡(PCD)的实时成像是监测癌症治疗效果和制定治疗方案的必要条件;然而，肿瘤内焦亡的特异性体内检测仍然具有挑战性。本文报道了一种双锁定串联激活探针(DTAP)，用于近红外荧光(NIRF)成像活小鼠肿瘤化学免疫治疗期间的瘤内焦亡。该探针包括一种双锁的半花青碱染料，该染料具有酶反应性片段，可以被与热作用相关的生物标志物(Caspase-1)和癌症生物标志物(GGT)同时切割，从而打开其NIRF信号。由于焦亡在触发抗肿瘤免疫反应中起着至关重要的作用，DTAP的激活信号与肿瘤浸润细胞毒性T淋巴细胞的数量和肿瘤生长抑制有很好的相关性，从而可以预测癌症的治疗效果。本研究也为研究焦亡在癌症治疗中的调控机制和优化精准医学的癌症化学免疫治疗提供了一种无创技术。