荧光探针是单分子成像的重要工具。然而，它们在生物系统中的应用往往受到光漂白、短寿命的限制。为了克服这一问题，作者开发了一种新颖的适用于方酸菁染料的硫化策略。通过对方酸菁的中心四元环丁烯进行硫化（硫方酸），作者观察到单分子水平上的光漂白寿命增加了约5倍。作者的单分子数据分析将这一改善归因于硫化带来的光稳定性的提高。有趣的是，在整体(bulk)环境中的测量显示，在光照下硫方酸会快速氧化为其氧化类似物，导致人们通常认为其光稳定性较差。这种整体和单分子环境之间的性质差异可以归因于后者的特殊环境因素，包括极低的浓度、极大的分子间距和受限的分子运动，这些因素减少了单个分子与其他荧光分子产生的活性氧物种之间的相互作用，最终影响了光漂白和光转换速率。作者展示了硫化方酸菁探针在各种成像缓冲液中的卓越性能，例如葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶（GLOX）和GLOX+trolox等。作者成功地利用这些光稳定的探针进行了膜蛋白CD56的单分子跟踪和活体神经元中线粒体运动的监测。CD56的单分子追踪揭示了不同膜蛋白的运动状态和相应的比例。这项研究有望推动单分子成像探针的发展，特别是在整体测量表现不佳的情况下。